细胞染色作为微生物检测中的重要一环,对细菌观测和菌种鉴别起到了关键作用。现截取《实用药品微生物检验检测技术指南》中间的部分内容,给需要了解相关基础知识的人士做参考。
微生物细胞含水量一般为80%~90%,菌细胞对光的吸收和反射与水溶液相近,在光学显微镜下,菌体透明,与背景几无反差,故常借助于染色使菌体吸着染料产生与背景较明显的差别,从而识别其个体形态和部分结构。但染色后的菌体是死细胞,其形态与结构会发生一些变化。同时,收到光学显微镜分辨能力的限制,欲观察其细微结构,尚须使用电镜。
微生物细胞染色的基本原理是根据细胞对染料的毛细现象、渗透、吸附、吸收等作用和细胞物质和染料的不同性质而发生的化学反应。细胞的酸、碱性对染料的吸附程度不同,如细胞核含大量核酸物质为酸性,对碱性染料有亲和力,易于着色,必要时应改变反应条件(如pH)。细菌的等电点一般为pH2~5,在中性、碱性或弱酸性溶液中(pH大于其等电点I),均带负电荷,而碱性染料离子带正电荷,因此带阴电的细菌易与带阳电的染料结合,所以细菌一般常用碱性染料染色。若细菌在其等电点低的pH溶液中,则带正电荷,则易于与带负电荷的染料染色。
影响微生物细胞染色除与... ...
(待续!)